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麻醉对整个手术至关重要,其麻醉的稳定性直接影响到手术结果的好坏。若要获得更好的麻醉效果,建议使用异氟烷呼吸麻醉,但由于呼吸麻醉成本较高且麻烦,多数实验室还是使用注射麻醉,因此这里以注射麻醉为例。
麻醉剂采用1%戊*巴*比*妥钠溶液(戊*巴*比*妥钠比水合氯醛麻醉更稳定,但容易产痰,咯痰时及时使用吸管吸出),剂量为0.5ml/100g(50mg/Kg)。腹腔注射前先对大鼠用异氟烷短暂麻醉,具体操作:将大鼠放进透明盒子中,此时将蘸有异氟烷的棉球丢入盒子内,密封,待大鼠安静不动,呼吸均匀(1次/秒)时取出。腹腔注射:将大鼠仰面朝向,提起一侧后肢,在大腿根与腹中线的中间位置刺入皮下,在皮下平行于腹中线推进针头3-5mm,再以45°角向腹腔内刺入,针尖通过腹肌后,无阻力,回抽无回流物,缓慢注入麻药。
注射麻药后,对大鼠进行疼痛反射(掐尾端或后脚掌)和眼角膜反射来判断麻醉效果。在15min之后还未能完全麻醉的大鼠可适当补加0.2-0.5ml的1%戊*巴*比*妥钠溶液。若手术时间较长,应每隔1h检查大鼠麻醉状态,当出现疼痛反应时,应补加0.5ml的1%戊*巴*比*妥钠溶液。手术中,应将大鼠舌头从口的一侧拉出,为防止大鼠在麻醉过程中呼吸道出现过多分泌物导致窒息,可在麻醉过程中注射0.5ml阿托品(1mg/ml)。